产品货号:
GL2398
中文名称:
无酶细胞消化液(含酚红)
英文名称:
Non-enzy Cell Detach Solution
产品规格:
100mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品不含胰蛋白酶等蛋白消化酶类,但能有效地使贴壁细胞与培养瓶皿表面脱离而达到分离细胞目的。消化后的细胞可进行传代培养,亦可用于提取核蛋白和胞浆蛋白、Western Blot、免疫共沉淀等实验,通常室温下10min左右就可以消化下大多数贴壁细胞,该消化液适用于消化肿瘤、脑、肝、肾、肺组织等,尤其适用于上皮组织。
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶经常用于动物组织的培养细胞消化或者一些组织的消化,但对细胞有的潜在损害,尤其是在37℃环境下危害较大。
- 作用温和;
- 对细胞的损伤和破坏极小,不影响细胞生物学特性,是肿瘤细胞的极好细胞脱壁方法;
- 可以在血清存在的情况下进行消化。
组分 | 规格 |
无酶细胞消化液(含酚红) | 100mL |
说明书 | 1份 |
保存:室温,有效期1年。
- PBS、培养液
- 显微镜
- 离心机
- 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
- 在使用细胞消化液的过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。
- 细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 贴壁细胞的消化
- 吸除培养液,用无菌PBS、培养液洗涤细胞1次。
- 加入少量无酶细胞消化液(含酚红),略盖过细胞即可(一般按细胞的有效体积的10倍添加)。
- 室温放置10min,如置于37℃脱壁反应会加速,直到细胞完全脱壁,不同的细胞消化时间有所不同。亦可显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除消化液。
- 加入细胞培养液或5倍体积PBS缓冲液终止反应。如果发现消化不足,则加入无酶细胞消化液(含酚红)重新消化。
- 1000~2000g离心3~5min,沉淀细胞,弃上清,尽量去除无酶细胞消化液(含酚红),加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
- 吸除培养液,用无菌PBS、培养液洗涤细胞1次。
- 组织的消化
- PBS、培养液清洗组织1次,用无菌的刮勺或茶匙将剪碎的组织碎片转移至合适容器。
- 按组织有效体积的5~10倍,加入无酶细胞消化液(含酚红)。
- 置于37℃作用4~48h,无需振荡,不同的细胞消化时间有所不同。对于较难分解的肿瘤细胞,可作用5天或更长时间,但应重新用消化液悬浮。
- 吹打组织碎片数次,释放松散的细胞,轻轻晃动培养瓶或皿,倒置显微镜下检查分离情况,当细胞量少和/或在组织碎片中仍可见细胞时,需要继续消化。
- 1000~2000g离心3~5min,沉淀细胞,弃上清,尽量去除无酶细胞消化液(含酚红),加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
- PBS、培养液清洗组织1次,用无菌的刮勺或茶匙将剪碎的组织碎片转移至合适容器。
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